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盘点稳定细胞株构建中的几个重要步骤

发表时间:2022-12-07 访问次数:676

  在生物药品制备的过程中,涉及到很多方法,而且随着技术的不断更新,各种更优质的方法不断出现,而稳定细胞株构建则是抗体制备中的佼佼者。细胞株开发的过程和早期生物药开发的方式不同,它的生产步骤主要为:宿主细胞选择、表达载体、稳定性检测,最后挑选表现最高的单克隆细胞株。对于不同的企业来说,这个过程是各不相同的,但是,其中有几个尤为重要的步骤需要引起我们的注意。

  1、制定流程及细胞系选择

  其实就是制定好详细的制备流程,同时选择合适的细胞系制备方式,选择合适的细胞,做好相应的准备工作,这样才能在更大程度上保证实验的进行。我们知道,现阶段的抗体药物都喜欢利用CHO细胞,也是重组抗体药物制备的细胞系。另外CHO培养过程中可以选择改良的哺乳动物细胞宿主,用于优化其制备过程;

  2、启动子的合成

  蛋白表达的实质其实就是一段DNA的表达,而所谓的启动子其实就是开启蛋白表达的标志。而通过优化并合成的启动子能够提供更多转录控制,促进生物制药的研发;

  3、自动化筛选平台的选择

  传统的方法往往采油工手动有限稀释法来进行筛选,虽然说能筛选出单个细胞,但是通量较低,操作方法复杂也容易造成污染。而自动化筛选不仅能够短时间内将成千上万个单细胞分离包裹,而且能形成细胞培养和多个单细胞的独立体系。不仅能够大量避免手动操作的不足之处,而且能在更大程度上保障其形成单克隆;

  4、细胞的稳定生长

  因为细胞在个体中会受到自身分泌的生长因子的影响,而培养液中不存在这类因子,需要手动加入。而且培养基中培养会形成一种抑制细胞生成的物质,需要去除。满足培养基中营养的需求,针对每种独特的细胞株配备合适的培养条件,保证单克隆获得最佳的存活机会;

  总的来说,稳定细胞株构建的过程中我们需要为其制备做好各种准备工作,让其在最佳的环境下培养,同时去除其中会产生的不良物质,以保证细胞株在最优条件下构建。只有这样,产生的细胞株才能够在更大程度上达到我们的需求。普健生物专业为广大用户提供稳定细胞株构建服务,如果您有相关需求,欢迎来电咨询。