稳定细胞株筛选各过程中的一些注意事项盘点

　　前面我们和大家简单介绍了一下有关稳定细胞株筛选的步骤，让大家对其有了一定的了解，那么，是不是就可以直接开始实验了呢?答案是否定的。在稳定细胞株筛选的过程中不仅有很多细节操作问题，还有很多注意事项，稍不注意，就可能造成实验的失败。有鉴于此，普健生物今天在这里和大家具体聊聊其注意事项问题。

　　1、筛选前的准备

　　筛选前我们需要确定药物筛选的相关浓度。对于不同的细胞来说，其对药物的敏感度是各不相同的，需要在细胞能够承受的浓度范围内，否则，很容易造成细胞表达低甚至死亡的情况;

　　2、筛选过程中的注意事项

　　筛选时间：一般在转染后48小时后进行，而对于慢病毒来说加药时间一般在72小时;

　　空白对照：在加药筛选时，需要提前设置好空白对照，全程对比细胞的变化情况;

　　换液操作：当细胞死亡达到一定的程度后，需要及时换液，以避免有害物质造成细胞的死亡;

　　3、克隆筛选过程中的注意事项

　　在进行单克隆筛选的时候，如果有荧光标记，则尽量选择那些带有荧光较强的细胞;如果质粒不带荧光标记，则只能进行盲挑。

　　当然了，无论是否带有荧光标记，都需要对其进行验证，而且尽量多挑几个来进行克隆，以保证成功率;

　　当然了，如上所述也只是注意事项中的一部分，对于不同实验的不同需求来说，注意事项也是各种各样的，比如基础的温度、PH值等等，这些都需要提前了解好，而后根据相应的需求来配置相应的环境，这样才能有效提升实验的成功率。武汉普健生物专业为广大用户提供稳定细胞株筛选服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。