稳定细胞株筛选的一般流程是怎样的?

　　稳定细胞株筛选技术在生物技术工程中是一项非常常用的技术，通过这个操作，能够筛选出可以稳定表达目的基因的细胞株。我们知道，稳定细胞株构建的目的就是为了能够得到可以持续表达的细胞，所以，筛选过程类似提纯的过程。那么，稳定细胞株筛选的一般流程是怎样的呢?今天，普健生物就和大家具体聊聊。

　　1、载体构建。选择合适的载体，然后将目的基因的DAN序列或蛋白编码序列克隆到合适的表达载体中，并构建成重组质粒;

　　2、细胞转染。将构建好的载体通过试单更多技术转染到目标细胞中(通常采用化学发、电穿孔法或病毒载体介导等方法)，通过细胞来进行目标蛋白的表达;

　　3、选择标记引入。转染后，将选中标记引入到细胞培养基中，从中挑选包含标记的细胞继续培养，无标记的则剔除掉(这个方法对蛋白表达本身没有太大意义，但是能够帮助我们挑选出包含目的基因的细胞);

　　4、单克隆挑选。将进过筛选后的细胞进行单克隆培养，筛选出能够稳定表达且高表达的细胞，并对其进行克隆;

　　5、稳定性验证。对稳定细胞系进行验证，确保目的基因的稳定高效表达;

　　6、功能性验证。对稳定细胞株进行功能型验证，以确保所得蛋白能够我们的需求;

　　总的来说，稳定细胞株筛选是一个非常复杂的过程，需要具备相当程度的耐性和细心，知道获得自己所需目的基因的细胞株为止。普健生物作为一家具备多年蛋白抗体制备和定制经验的公司，专业为您提供稳定细胞株构建及筛选服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。