盘点稳定细胞株构建时的常用步骤

　　之前我们和大家聊过稳定细胞株筛选，其实就是从构建的稳定细胞株中挑选出稳定表达且目的蛋白质量高的细胞株。今天，我们再和大家具体聊聊有关稳定细胞株构建的常用方法。

　　总共的来说，稳定细胞株因为技术实力、仪器、原材料以及需求不同，其构建方法也是各不相同的，不过，常用的一些方法也大体相同。

　　1. 转染：这是最常用的方法之一，通过将目标基因的表达载体导入到目标细胞中实现。

　　转染的方法一般包括：化学转染和病毒转染两种。

　　化学转染：使用化学物质(例如聚乙烯亚胺、磷脂体等)将表达载体引入细胞内。

　　病毒转染：使用病毒作为介导体，将表达载体传递到细胞中。常用的病毒载体包括腺病毒、逆转录病毒和腺相关病毒等。

　　2.电穿孔：通过电脉冲的作用，在细胞膜上形成临时的微孔，使表达载体得以进入细胞。这种方法可以在不使用病毒或化学物质的情况下实现转染。

　　3.瞬时转染：这种方法不涉及稳定细胞株的构建，而是将目标基因的表达载体短暂地导入细胞中，使其在一段时间内表达目标基因或蛋白质。这可以用于快速评估目标基因的功能或进行临时的表达实验。

　　在进行稳定细胞株构建时，我们常常会进行相关的标记，以便于在转染后期进行相关的筛选工作，这样，就能够更加精确地让我们获得稳定细胞株。而且作为现阶段使用相对广泛的一种蛋白表达技术，稳定细胞株的重要性是不言而喻的，而且随着技术的不断发展，相信在不仅的将来，其使用将会更加的广泛。普健生物专业为广大用户提供稳定细胞株构建服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。