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稳定细胞株构建时如何提升细胞转染效率?

发表时间:2023-11-13 访问次数:423

  在进行稳定细胞株构建时,为了将目的蛋白基因载入到宿主细胞中,我们都会选择通过转染的方式来实现。可以说,转染的成功与否,直接关系到目的蛋白表达的结果。那么,我们在进行稳定细胞株细胞转染时,有没有什么办法提升其转染效率,起到事半功倍的效果呢?今天,普健生物就和大家具体聊聊。

  我们知道,常用的细胞转染方法主要有三种,分别是生物转染、物理转染以及化学转染。

  生物转染:其实就是通过病毒感染的方式,将目标蛋白DNA整合到宿主细胞中去;

  物理转染:通过电穿孔、细胞注射等方法,直接将目的蛋白DNA注入到宿主细胞中去(不过容易造成细胞死亡);

  化学转染:利用阳离子与阴离子核酸结合的特性,使得两者相互吸引,从而实现转染;

  从上面的描述我们不难看出,对于不同的转染方法,其有着不同的优势和劣势,其转染效率主要和如下几个方面有关:

  1、细胞活力。转染成功率和细胞活性有着极大的关系,自然是活力越强,转染的成功率就越高,而且和细胞类型也有着一定的关系;

  2、细胞融合度。融合度越高,能够在一定程度上提升细胞转染的接受程度;

  3、核酸类型。简单核酸类型转染成功率更高,反之越是复杂,成功率相对月低;

  4、转染方法。对于不同类型的细胞选择不同类型的转染方法其成功率存在着极大的不同;

  所以,想要提升稳定细胞株细胞转染的目的,我们可以从如下几个方面入手:

  1、选择活性高的细胞。尽量选择那些细胞活性高的细胞,避免选择活性低的细胞;

  2、提升核酸纯度。细胞转染时需要保证目的DNA与RNA尽可能同质,确保每个步骤不收RNA酶的影响;

  3、合适的细胞密度。需要控制好细胞密度,过高或过低都会造成转染效率变低;

  4、选择合适的转染方法。根据细胞的类型选择合适的转染方法,不要一直使用单个转染方法;

  总的来说,我们在稳定细胞株细胞转染时,需要结合细胞类型及其细胞活性来进行方法选择,在转染过程中需要注意到各类细节问题,只有这样,才能更好地保证实验的成功。武汉普健生物专业为广大用户提供稳定细胞株构建服务,如果您有相关需求,欢迎来电咨询。