稳转细胞株的构建-构建原理及其构建方法盘点

　　随着生物技术的发展，越来越多的方法开始在抗体药物生产中投入使用。抗体药物开发是一个非常繁琐的过程，而稳定细胞株则几乎适用于抗体药物开发的各个阶段。无论是重组蛋白、抗体生产，还是检测分析和功能性研究，几乎都适合使用。今天，普健生物就和大家具体聊聊有关稳定细胞株构建的原理及方法。

　　其实很多人禁不住地想问：什么是稳定细胞株?它到底是个什么操作?

　　所谓的稳定细胞株，其实就是能够实现稳定表达的细胞株，基于某一细胞系构建的持续性过表达或干扰特定基因的细胞系。我们知道一般的细胞是无法实现持续表达的，而稳定细胞株则能够通过一定的方法让细胞实现稳定持续性表达;

　　稳定细胞株的构建原理是什么?

　　通过基因技术将外源DNA或RNA克隆到具备某种抗性的载体上，重组的载体则会整合到染色体中，并随着细胞的分裂稳定传导下去，而后再对细胞进行筛选，这样就能获得我们所需能够实现稳定表达的细胞株;

　　为什么要用到稳定细胞系?

　　1、使用稳定细胞系能够有效降低频繁转染的成本;

　　2、可以更好地实现基因干扰表达的结果;

　　3、避免因为人为原因所造成的结果不准确的情况;

　　什么时候需要用到稳定细胞系?

　　1、外源基因需要实现长期稳定表达时;

　　2、需要使用到诱导表达系统时;

　　3、目的基因过表达或需要跟然时空特异性时;

　　4、细胞或病毒无法实现高传导效率时;

　　5、需要向动物体内注射外源表达片段细胞时;

　　6、细胞个体存在差异时;

　　7、需要将外源片段插入基因组中时;

　　而目前常用的稳定细胞构建方法主要有三种：单克隆环法、96孔单克隆稀释法、逆转录病毒混合克隆制备法，这些方法我们将在后期和大家具体介绍，本次就不赘述了。

　　总的来说，稳定细胞株的构建能够在极大程度上避免一些重组蛋白所产生的无法表达的情况，以及应对一些细胞无法实现高表达的情况。当然了，稳定细胞株也非万能的，在很多情况下反倒会造成相关资源的损耗，所以，需要结合实际情况来进行选择。普健生物专业为您提供稳定细胞株构建服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。